无菌室建设一般有哪些要求?

   无菌室一般是在微生物实验室内专辟一个小房间。可以用板材和玻璃建造。面积不宜过大,约4~5平方米即可,高2.5米左右。无菌室外要设一个缓冲间,缓冲间的门和无菌室的门不要朝向同一方向,以免气流带进杂菌。无菌室和缓冲间都必须密闭。室内装备的换气设备必须有空气过滤装置。那么无菌室建设一般有哪些要求呢?

  (1)无菌操作间的洁净度应达到10000级,室内温度保持在20℃-24℃,湿度保在45%~60%,超净台洁净度应达到100级。无菌室应每月检查菌落数,在无菌室或超净工作台开启的状态下,取内径90mm的无菌培养皿若干,无菌操作分别注入融化并冷却至约45℃的平板计数琼脂培养基的15mL,放至凝固后,倒置于36℃±1℃培养箱培养48h,证明无菌后,取平板3~5个,分别放置在工作位置的左中右等处,开盖暴露30分钟后,倒置于36℃±1℃培养箱培养48h,取出检查。100级洁净区平板杂菌数平均不得超过1个菌落,10000级的洁净室平均不得超过3个菌落,如超过限度,应对无菌室进行消毒,直至重复检查合乎要求为止。
  (2)无菌室应保持清洁整齐,室内仅存放必须的检验用具如酒精灯、酒精棉、打火机、镊子、接种环、剪刀及玻璃笔等。严禁堆放杂物,以防污染。
  (3)无菌室应备有工作浓度的消毒液,如5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新洁尔灭溶液等等。
  (4)需要带入无菌室使用的仪器、药品、玻璃器皿等一切物品,均应包扎严密或应经适宜的方法灭菌。如培养皿、吸管用不锈钢简装好在160℃-170℃的干燥箱中灭菌1h~2h;生理盐水用高压灭菌器于121℃灭菌20分钟等。
  (5)无菌室使用前必须打开无菌室和缓冲间的紫外灯辐照30分钟以上,并且同时打开净化风机进行换气。在紫外灯关闭后半小时方可进入无菌室进行工作。在样品检验完毕后,应及时清理剩余样品和各种药品及玻璃器皿,安全退出后再打开所有紫外灯辐照灭菌30分钟。
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